DESAIN PRIMER UNTUK IDENTIFIKASI GEN LUCIFERASE PADA KUNANG-KUNANG GENUS Lamprigera (Lampyridae: Coeloptera)

Abstract

Enzim luciferase dari kunang-kunang banyak dimanfaatkan pada dunia modern, namun gen luciferase pada kunang-kunang masih sedikit digunakan untuk mendapatkan enzim luciferase terutama pada genus Lamprigera.  Informasi mengenai gen luciferase pada genus Lamprigera sulit ditemukan, sehingga untuk mendapatkan gen luciferase pada genus memerlukan primer yang didesain sendiri. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan primer yang bisa mengamplifikasi gen luciferase yang terdapat pada Lamprigera sp.  Metode yang digunakan dalam penelitian ini yaitu metode desain primer menggunakan aplikasi Geneious prime 5.6.7. Untuk melihat keberhasilan desain primer tersebut, dilakukan amplifikasi dengan metode PCR pada suhu yang bervariasi pada tahap annealing. Hasil dari penelitian ini berupa sepasang primer dengan kode Lampyridae F dan Lampyridae R yang memenuhi kriteria primer yang baik yaitu panjang primer forward 22 dan reverse 24 nukleotida, % GC forward 45,5% dan reverse 41,7 % dan temperature melting (Tm) forward 56,3 °C dan reverse 55,1 °C.  dengan panjang produk 529 bp.   Primer juga diuji dengan mengamplifikasi langsung gen luciferase pada cDNA Lamprigera sp. Hasil amplifikasi menunjukan bahwa primer mampu mengamplifikasi gen luciferase dengan panjang produk lebih dari 500 bp, sehingga dapat disimpulkan bahwa primer yang didapatkan bisa dipakai untuk mengamplifikasi gen luciferase pada cDNA Lamprigera sp.